这可是基础中的基础,就像盖房子得先打好地基。我们得用试管做斜面培养基,再接种原始试管种。这里有俩培养基配方,一是综合马铃薯培养基,要用到马铃薯200克、葡萄糖20克啥的;二是合成培养基,有马铃薯20克、蛋白胨10克等。
制作时,先把马铃薯切片煮15 - 20分钟,过滤后加水到1000毫升,加琼脂溶化,再放其他药品。分装时,用漏斗等工具,把培养基装到试管1/4处,塞好棉塞扎成捆,封上塑料纸。接着灭菌,放高压蒸气灭菌锅,1公斤/厘米压力、121℃下灭20分钟,压力降0后放气,趁没凝固摆成斜面。最后接种培养,无菌操作接入菌种,28℃培养3天,再降到24℃,12 - 15天菌丝长满就成母种啦。
把母种接到原种培养基扩大繁殖,一般用广口瓶或袋装。培养基配方也有俩,一个是木屑麸皮培养基,阔树木78%、麸皮20%等;另一个是棉籽壳木屑混合培养基,棉籽壳90%等。
拌料时选新鲜原料,把麸皮等混匀,糖和过磷酸钙溶水后按比例加水,含水量60%,手握指缝有水欲滴就行。堆闷30分钟装瓶(袋),压实,套塑料环,塞棉塞或包牛皮纸。灭菌有高压和常压两种,高压120℃、1公斤/厘米²下灭2 - 3小时;常压90 - 103℃,100℃下维持8 - 10小时。接种前,用0.2%来苏水或漂白粉给接种箱或接种室消毒,再用紫外线灯照30分钟或用烟雾剂薰蒸。一般一支母种接4 - 6瓶(袋)原种,放发菌室,22 - 26℃、湿度80%以下、弱散射光,通风要好,30 - 40天菌丝长满。
一般用15×33×0.05规格塑料袋,无棉盖体封口。一瓶原种能接50瓶(袋),配方、拌料等和原种塑料袋制备一样。
这可太重要了,关系到能不能成功发菌和产量效益。鉴定分两方面,一是是不是咱要的黑木耳种类,二是不是优良菌株。正常菌丝洁白、活力旺,发菌45天后瓶(袋)会有菊花或梅花状胶质原基,颜色明褐到黑褐色。要是瓶(袋)底有淡黄色液体、上半部有黄色粘液,培养基收缩,那就是过期老化菌种,得淘汰。菌丝只长到1/3 - 1/2处就有淡黑色胶状耳基,可能是早熟、扩繁次数多或光线强。菌丝只长角落不蔓延,可能是培养基干湿问题;蔓延停了还有抑制线,多是杂菌。发菌时发现杂菌赶紧挑出来不用。
我觉得掌握了这些黑木耳制种技术,大家离成功种出黑木耳就不远啦,都可以试试哟!
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